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浅谈高效液相色谱法测定白花蛇舌草中槲皮素的含量

2017-06-27 14:53:00

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Abstract:Objective?To?determine?the?content?of?quercetin?in?Hedyotis?diffusa?Willd.?Methods?The?analysis?was?performed?on?an?HPLC?C18?column?(4.6?mm×200?mm,5?μm)?at?the?detection?wavelength?of?370?nm.?The?mobile?phase?consisted?of?0.2%?phosphoric?acid?methanol?(50∶50)?with?a?flow?rate?of?1?mL/min.?Results?The?calibration?curve?was?linear?in?the?range?of?0.08-0.32?μg?of?quercetin?(r=0.999?6).The?average?recovery?was?101.5%?with?RSD?0.8%?(n=6).Conclusion?The?method?is?simple,rapid?and?accurate?for?the?determination?of?quercetin?in?Hedyotis?diffusa?Willd,?which?could?be?used?for?the?quality?control?of?Hedyotis?diffusa?Willd.

  Key?words:Hedyotis?diffusa?Willd.;?quercetin;?HPLC

  白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草(Hedyotis?diffusa?Willd.)的干燥全草,研究表明该植物主要含有黄酮类、三萜类、蒽醌类、环烯醚苷萜类、甾醇类、烷烃类等化学成分,具有抗肝炎、抗肿瘤、抗病毒、抗炎抑菌、降血脂及降血糖等多种药理活性[1]。白花蛇舌草中黄酮类化合物的含量测定未见文献报导,本文采用HPLC法测定了白花蛇舌草中槲皮素的含量,为评价白花蛇舌草的内在质量提供科学依据。

  1?仪器与药品

  高效液相色谱仪:P230高压恒流泵/DAD230二极管阵列检测器(大连依利特分析仪器有限公司),Hypersil?BDS?C18色谱柱(4.6?mm×200?mm,5μm,大连依利特分析仪器有限公司);电子精密天平(Ohaus);KS?1500超声清洗器(宁波科胜仪器厂);高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。

  白花蛇舌草(市售,批号2006001,2006002,2006003),经本校药植教研室陈再兴老师鉴定均为白花蛇舌草(Hedyotis?diffusa?Willd.);槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所,批号100081-200406,供含量测定用);甲醇为色谱纯;水为重蒸水。

  2?结果与分析

  2.1?色谱条件

  色谱柱:Hypersil?BDS?C18色谱柱(4.6?mm×200?mm,5?μm),流动相:甲醇?水?磷酸(体积比50∶50∶0.2);检测波长:370?nm,流速:1?mL/min,柱温:25?℃?,进样量:20?μL。色谱图见图1、2。

  2.2?对照品溶液的制备

  精密称取经五氧化二磷干燥过夜的槲皮素对照品适量,加甲醇制成每1?mL含槲皮素10?μg的溶液,即得。

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